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    倒置熒光顯微鏡的濾色系統和照明選擇

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      在倒置熒光顯微鏡中,熒光光源裝置是提供一定波長的激發光使標本受激發射熒光,再通過顯微鏡的物鏡,B鏡系統使熒光圖象放大以供觀察,因此,一般來說,任何顯微鏡都可以用于熒光顯微術。
     
      濾色系統是熒光顯微鏡的重要部分,它由激發濾片(第一相片)和抑制濾片(第二濾只)所組成。前者提供一定波長范圍的激發光,后者提供相應波長范圍的熒光。其玻片通常用有色玻璃組成。其型號各國均不相同。
     
      熒光顯微鏡激發濾片根據光源和熒光色突的特點,可分為露外光激發濾片,紫氏光激發濾片和紫外藍光激發濾片。熒光顯微鏡所需激發濾片的厚度,主要根據所用顯微鏡激發方式而定,暗場熒光顯微術要求激發濾片薄一些,明場時則要求厚一些,因為使用暗場時激發光不會按進入物鏡,另外還得考慮標本情況和目的性,基本原則是以獲得明亮的熒光相更好的背景襯托為準。
     
      熒光顯微鏡抑制濾片的選擇,主要根據激發濾只而定。其原則是以完全吸收激發光為目的,透過任何可見光(完全互補)以保護眼睛不受紫外光的刺激和損害。為與激發濾片相對應,抑制濾片也可分為:紫外光抑制濾片、紫藍光抑制濾片和紫外驗光抑制濾址。
     
      上面介紹了倒置熒光顯微鏡的濾色系統后,再來了解下倒置熒光顯微鏡的照明選擇根據什么來考慮。
     
      熒光顯微鏡的照明可根據聚光器的構造和激發光的波長按以下三點考慮:
     
     ?、購臒晒庀竦姆床钜髞砜?,UV激發暗場聚光器照明更好。
     
     ?、谝韵竦牧炼葋砜紤],BV激發濾光片暗場觀察效率更高。
     
     ?、踀V激發濾光片暗場觀察和BV激發暗場聚光器照明的特性,可看作介于這兩種照明方法之間,但前者濾光片暗場的性質較強,顯示圖像較明亮,反差小;后者因保留暗場光路的性質,故顯示圖像較暗,而反差有所改善。當實際使用熒光顯微鏡時,應采用更適合標本要求的照明法進行觀察。

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